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E. coli DNA Ligase
NEBU recombinant 16 65 Heat

E. coli DNA Ligaseは以下の基質をライゲーションする。

dsDNA




ニックの入ったDNA/RNA



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DNA Ligase

DNA Ligation

製品番号# 濃度 サイズ 価格（税別）
M0205S 10,000 units/ml 200 units ¥12,800
M0205L 10,000 units/ml 1,000 units ¥50,600
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  • E. coli DNA Ligaseは、隣接した2本鎖DNA内の付着末端の5´-リン酸末端と3´-ヒドロキシル末端とのホスホジエステル結合の形成を触媒する。平滑末端基質に対しては明らかに活性を示さない。E. coli DNA Ligaseは、補因子としてNADを使用し、熱不活化することができる。E. coli DNA Ligaseは、温度範囲（4°C–37°C）で活性を示す。 

    Highlights

    • 比活性：6,000 units/mg
    • 10X反応バッファー付属

    由来

    クローニングした E. coli DNA Ligase遺伝子を含有するE. coli株から精製。
    関連する製品カテゴリ:
    DNA Ligases Products
    本製品は以下のアプリケーションに使用できる:
    Non-Cloning Ligation

    • 付属品

      The following reagents are supplied with this product:

      NEB # Component Name Component # Stored at (°C) Amount Concentration
      • M0205S     -20    
          E. coli DNA Ligase M0205SVIAL -20 1 x 0.02 ml 10,000 units/ml
          E. coli DNA Ligase Reaction Buffer B0205SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X
      • M0205L     -20    
          E. coli DNA Ligase M0205LVIAL -20 1 x 0.1 ml 10,000 units/ml
          E. coli DNA Ligase Reaction Buffer B0205SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X

    • 特性と使用方法

      ユニット定義

      1ユニットは、全反応容量20 μlの1XE. coli DNA Ligase Reaction Buffer中、16°C、30分間で、λDNA（5' DNA末端濃度0.12 μM、300 μg/ml）のHindIII断片の50%をライゲーションするために必要な酵素量として定義される。

      反応条件

      1X E. coli DNA Ligase Reaction Buffer
      Incubate at 16°C

      1X E. coli DNA Ligase Reaction Buffer
      30 mM Tris-HCl
      4 mM MgCl2
      26 µM NAD
      1 mM DTT
      50 µg/ml Recombinant Albumin
      (pH 8 @ 25°C)

      Usage Concentration

      10,000 units/ml

      Storage Buffer

      10 mM Tris-HCl
      50 mM KCl
      1 mM DTT
      0.1 mM EDTA
      200 µg/ml Recombinant Albumin
      50% Glycerol
      pH 7.4 @ 25°C

      熱による不活性化

      65°C for 20 minutes

    • Advantages and Features

      Application Features

      • Okayama-Berg法cDNAクローニング（3）

    • Related Products

      Companion Products

    • Product Notes

      1. rATPを使用する他のリガーゼとは対照的に、補因子としてNAD+（ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド）を必要とする。
      2. 平滑末端同士のライゲーション効率は極めて低い。平滑末端同士のライゲーションには、Blunt/TA Ligase Master Mix（カタログ番号：M0367）を推奨する。
      3. RNAとDNAのライゲーションはできない(4)。
      4. この酵素は付着末端を持つDNA同士のライゲーションに使用する。

    • References

      1. Panasenko, S.M. et al. (1977). Science. 196, 188-189.
      2. Panasenko, S.M. et al. (1978). J. Biol. Chem.. 253, 4590-4592.
      3. Okayama, H. and Berg, P. (1982). Mol. Cell. Biol.. 2, 161-170.
      4. Higgins, N.P. and Cozzarelli, N.R. (1979). R. Wu(Ed.), MethodsEnzymol.. 68, 50-71. New York: Academic Press.

  • プロトコール、マニュアル＆使用方法

  • オンラインツール＆技術情報

  • FAQ＆トラブルシューティング

  • 参考文献＆技術情報

  • 品質、安全性情報、法的情報

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